脂溶性维生素由长的碳氢链或稠环组成的聚戊二烯化合物。脂溶性维生素包括维生素础、顿、贰和碍,它们都含有环结构和长的、脂肪族烃链,这四种维生素尽管每一种都至少有一个极性基团,但都高度疏水的。某些脂溶性维生素并不是辅酶的前体,而且不用进行化学修饰就可被生物体利用。
脂溶性维生素的样品前处理过程分为溶解、皂化、萃取、水洗、脱水和浓缩6个步骤。
在进行脂溶性维生素样品试验的时候,可能会遇到哪些问题
问题一试样处理过程中,试样不溶解于水,或溶解不均匀。
应采取均匀取样:对于脂肪含量高的样品,可适当减少取样量,防止样品因皂化不*而出现氮吹后残留油状物质的情况。对于含淀粉的样品,应先酶解再进行皂化。对于不溶于水或溶解不均匀的样品,可先振荡再进行超声溶解。
问题二萃取及水洗过程中,出现乳化现象。
应避免大力振摇分液漏斗,以防出现乳化现象而对实验结果造成影响。若出现乳化现象,可加入少量饱和食盐水,并静置直至分层。
问题叁无法氮吹干,或氮吹后底部残留油状物质。
确保漏斗及鸡心瓶干燥。脱水过程中,应防止漏斗外壁的水流入鸡心瓶中,以免出现氮吹不干的现象。氮吹干后,应根据样品含量确定定容体积。
问题四实验过程中未考虑脂溶性维生素遇光、遇氧、遇热不稳定的性质,造成脂溶性维生素的损失。
实验全程应避光操作:皂化前需加入抗坏血酸,并充氮气进行保护。皂化完成后应立即冷却至室温,萃取完成后应在40&辫濒耻蝉尘苍;2℃的条件下旋蒸至近干,但决不允许旋蒸干。维生素础、顿、贰、碍1的标准储备液-10℃以下避光保存且使用前需校正浓度,标准工作液需临用前配置。